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    怎樣知道ELISA試劑盒的真假？

    發(fā)布時(shí)間： 2022-04-21　　點(diǎn)擊次數(shù)： 979次
     　　ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來，得到科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣，尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展?，F(xiàn)在市場(chǎng)上，賣試劑盒的那么多，怎樣知道產(chǎn)品的真假？針對(duì)此問題做出分析回應(yīng)，今日教您ELISA試劑盒怎么一辨真假！
    　　可利用穿插試驗(yàn)即可區(qū)分ELISA試劑盒是否造假，辦法如下：
    　　1.取出購(gòu)買的試劑盒A的包被板兩條；
    　　2.一條包被板加試劑盒A的規(guī)范品做規(guī)范曲線；
    　　3.另一條包被板加試劑盒B的規(guī)范品做規(guī)范曲線；
    　　4.后續(xù)操作依照試劑盒闡明書進(jìn)行，加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物；
    　　5.試驗(yàn)結(jié)束后，檢測(cè)兩條規(guī)范曲線，假如兩條規(guī)范曲線共同則闡明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的同一個(gè)目標(biāo)而非A和B，即該試劑盒為偽劣編造ELISA試劑盒。
    　　6.假如兩條規(guī)范曲線不共同則闡明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的不同目標(biāo)，試劑盒A只能檢測(cè)A，不能檢測(cè)B，即該試劑盒為正常的。
    　　ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)：
    　　一、包被
    　　1、將包被抗原用包被緩沖液配制包被液，每孔取100 mL加入酶標(biāo)板，蓋好蓋板膜，包被條件如下表，4℃ 16-20h包被時(shí)酶標(biāo)板可以疊放，而37℃ 2h包被時(shí)酶標(biāo)板之間的間距應(yīng)保持一致(一般為5cm)。根據(jù)培養(yǎng)箱的設(shè)計(jì)調(diào)節(jié)酶標(biāo)板間的間距，如培養(yǎng)箱從底部產(chǎn)熱，則應(yīng)增加下層酶標(biāo)板間的間距為10cm 。
    　　2、包被加樣采取吸二打一的方式，應(yīng)避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根據(jù)該滴溶液是否應(yīng)加入孔內(nèi)再做判斷，若應(yīng)加入，則小心振蕩使其落入孔底，反之則用吸水紙小心吸出，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。
    　　3、包被前預(yù)吸查看槍頭是否合格，水流是否一致，不一致者應(yīng)更換槍頭，包被應(yīng)采用槍頭，每包被一塊板，應(yīng)將槍頭套緊，并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致，在包被過程中若出現(xiàn)任何小問題，都應(yīng)將此塊板做出記號(hào)，以便后期組裝入庫時(shí)淘汰。
    　　4、若采用37℃ 2h包被模式，則應(yīng)給酶標(biāo)板編碼，保證每塊板子的包被時(shí)間一致。
    　　二、洗板
    　　1、包被后要進(jìn)行兩次洗滌，250微升/孔，洗滌完畢后，應(yīng)在毛巾上拍干參與液體，并及時(shí)進(jìn)行下一步封閉。
    　　2、 洗滌時(shí)要注意查看水流是否一致，在洗滌程中若出現(xiàn)任何小問題，都應(yīng)將此塊板做出記號(hào)，以便后期組裝入庫時(shí)淘汰。
    　　三、封閉
    　　1、封閉液應(yīng)提前一小時(shí)取出初步回溫，用前搖勻，每孔取180 mL加入酶標(biāo)板，蓋好蓋板膜，37℃封閉 1.5h, 酶標(biāo)板之間的間距應(yīng)保持一致(一般為5cm)。根據(jù)培養(yǎng)箱的設(shè)計(jì)調(diào)節(jié)酶標(biāo)板間的間距，如培養(yǎng)箱從底部產(chǎn)熱，則應(yīng)增加下層酶標(biāo)板間的間距為10cm 。
    　　2、封閉加樣采取吸一打一的方式，應(yīng)避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根據(jù)該滴溶液是否應(yīng)加入孔內(nèi)再做判斷，若應(yīng)加入，則小心振蕩使其落入孔底，反之則用吸水紙小心吸出，殘留在槍頭內(nèi)的溶液不要打出 以免產(chǎn)生氣泡。并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡
    　　3、封閉前預(yù)吸查看槍頭是否合格，水流是否一致，不一致者應(yīng)更換槍頭，封閉應(yīng)采用槍頭，每封閉一塊板，應(yīng)將槍頭套緊，并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致，在封閉過程中若出現(xiàn)任何小問題，都應(yīng)將此塊板做出記號(hào)，以便后期組裝入庫時(shí)淘汰。
    　　四烘干裝袋
    　　1、封閉完后，摔倒孔內(nèi)液體，并在毛巾上拍干，接下來采取烘干或者晾干的方式*干燥酶標(biāo)板。烘干：37 ℃倒置(不加蓋板膜或用自封袋)，每5塊板烘干30 min，隨著板子數(shù)量增多時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)，如100塊板，需要烘3 h，依次類推；晾干：底部鋪一層干凈的A4紙或者吸水紙，倒置板子，在頂層鋪一層蓋住避光，室溫晾18-24h。
    　　2、板子干燥后，應(yīng)及時(shí)裝入自封袋，按照每塊板1袋干燥劑的量裝入，袋子外面寫好板子制備日期，放入本成品庫冷藏環(huán)境保存?zhèn)溆谩?/span>